發(fā)布日期:2021/07/26
革蘭氏染色法,是指細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種重要的鑒別染色法。
革蘭氏染色法的染色原理
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革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟,未經(jīng)染色的細(xì)菌,由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難區(qū)別。通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)菌細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,再用95%乙醇脫色。經(jīng)染色后,陽性菌呈紫色,陰性菌呈紅色,可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,從而用以分類鑒定。
革蘭氏染色液使用注意事項
1、要用活躍生長期的幼培養(yǎng)物作革蘭氏染色
2、涂片不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性
3、火焰固定不宜過熱(以玻片不燙手為宜)
4、乙醇脫色是革蘭氏染色操作的關(guān)鍵環(huán)節(jié):脫色不足,陰性菌被誤染成陽性菌;脫色過度,陽性菌被誤染成陰性菌。因而脫色時間一般為20-30s。
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