發(fā)布日期：2021/04/20

雙縮脲試劑由NaOH溶液和CuSO4溶液組成，可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在。雙縮脲法測定蛋白質(zhì)的測定范圍是1~10mg蛋白質(zhì)。

（1）溶液濃度

雙縮脲試劑中NaOH溶液（雙縮脲試劑A）的濃度為0.1g/ml，CuSO4溶液（雙縮脲試劑B）的濃度為0.01g/ml。 

（2）使用原理

鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑，發(fā)生的是雙縮脲反應(yīng)。雙縮脲反應(yīng)實質(zhì)是在堿性環(huán)境下的Cu2+與雙縮脲試劑發(fā)生的紫色反應(yīng)。而蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲（H2NOC-NH-CONH2）結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，所以蛋白質(zhì)都能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)，可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在。 

（3）使用方法

雙縮脲試劑使用時，先加入NaOH溶液（2mL），振蕩搖勻，造成堿性的反應(yīng)環(huán)境，然后再加入3~4滴CuSO4溶液，振蕩搖勻后觀察現(xiàn)象。 在堿性溶液中，蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑形成紫紅色配合物，其顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比。


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