發(fā)布日期:2024/09/04
一、根據用途不同,微生物培養(yǎng)基可以大致分為以下幾類:
1、基礎培養(yǎng)基:含有細菌基礎生長所需的基本營養(yǎng)成分,最常用的是肉浸液,俗稱肉湯,主要含生肉浸液和蛋白胨,用于細菌的增菌、檢驗,也是制備其他培養(yǎng)基的基礎成分。
2、營養(yǎng)培養(yǎng)基:基礎培養(yǎng)基中加入血液、 葡萄糖、生長因子等特殊成分,供營養(yǎng)要求高的細菌和需要特殊生長因子的細菌生長,最常用的是血瓊脂平板和巧克力血平板等。
3、鑒別培養(yǎng)基:在某些培養(yǎng)基中加入一些特定物質, 如糖、苷、醇類、氨基酸、蛋白質等和指示劑,測定細菌的生化反應,以鑒別和鑒定細菌用的培養(yǎng)基。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅-亞甲藍瓊脂和動力-吲哚-尿素(MIU) 培養(yǎng)基等。
4、選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入抑制劑,抑制標本中雜菌生長,有助于所選擇的細菌種類的生長。如培養(yǎng)腸道致病菌的沙門-志賀瓊脂。
5、特殊培養(yǎng)基:某些細菌在生長繁殖時需要特殊的條件才能夠生長,包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,后者是針對細胞壁缺損的細菌L型。
二、微生物培養(yǎng)基的組成成分主要包括以下幾類:
(1)營養(yǎng)物質
不同的細菌對營養(yǎng)的要求不同,但細菌需要的營養(yǎng)物質應含有氨源、碳源、無機鹽類和生長因子等。
1、碳源:最常用的碳源是葡萄糖,它提供能量和碳元素用于細胞的代謝和生長。除了葡萄糖,還可以使用其他碳源,如乳糖、果糖等。
2、氮源:氮源是細胞合成蛋白質和核酸所必需的。常見的氮源包括氨基酸、蛋白胨、酵母提取物、尿素等。
3、礦物質和無機鹽:提供細菌生長的各種元素,如鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、磷、硫等。最常用的有氯化鈉和磷酸鹽,前者維持酶的活性、調節(jié)菌體內外的滲透壓,后者是細菌良好的磷源,并具有緩沖作用。
4、維生素:維生素是細胞合成酶的輔因子,對細胞生長和代謝過程至關重要。常見的維生素包括維生素B群、維生素C、維生素E等。
5、氨基酸:氨基酸是蛋白質合成的組成單元,對于細胞的生長和功能非常重要。培養(yǎng)基中通常包含一部分或全部必需氨基酸,而非必需氨基酸通常不需要額外添加。
6、生長因子和激素:生長因子和激素可以促進細胞的增殖和分化。不同類型的細胞需要特定的生長因子和激素來實現最佳生長條件。
(2)凝固物質
制備固體培養(yǎng)基時,需在液體中加入凝固物質。常用凝固物質為瓊脂,某些情況下也可用明膠、卵白蛋白、血清等。瓊脂是從石花菜中提取出來的一種半乳糖膠,溫度在98℃以上時可溶于水,在45℃以下可凝固成凝膠狀態(tài),不被細菌分解利用,無營養(yǎng)作用。
(3)抑制劑和指示劑
制備培養(yǎng)基時常加入抑制劑和指示劑,不是細菌生長繁殖所必需的物質,而是選擇、鑒定及判斷結果的需要。
1、抑制劑:具有選擇抑制作用,在制備培養(yǎng)基 時加入定種類的抑制劑, 可抑制非檢出菌(非病原菌)的生長,利于檢出菌(病原菌)的生長,常用有膽鹽,煌綠、亞硫酸鈉、亞硒酸鈉及-些染料和某些抗生素等。
2、指示劑:在培養(yǎng)基中加入一定種類的指示劑, 觀察細菌是否利用和分解培養(yǎng)基中的糖、醇類。常用的有粉紅、甲基紅、中性紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍和中國藍等酸堿指示劑。亞甲藍常用作氧化還原指示劑。
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