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        光復(fù)新聞

        實(shí)驗(yàn)室微生物檢測的注意事項(xiàng)

        發(fā)布日期:2022/07/15


        在微生物檢驗(yàn)操作過程中,要保證檢測環(huán)境(如超 凈臺、檢測室)以及所用工器具的潔凈程度,同時保證人員各種操作的規(guī)范性,盡 量保證其無菌性,防止因人為原因操作失誤而出現(xiàn)誤差結(jié)果,同時在適宜溫度進(jìn)行培養(yǎng),為合理決策和指導(dǎo)生產(chǎn)提供依據(jù)。為保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,我們應(yīng)做好以下幾個方面。

         

        微生物培養(yǎng)基的滅菌及使用


        1.每次配制時,要注意其生產(chǎn)日期是否在保質(zhì)期內(nèi),查看其開瓶日期及瓶口密封性,保證其未變質(zhì),并且未吸潮。

        2.培養(yǎng)基配制時,稱量要準(zhǔn)確,包括鹽水的分裝要準(zhǔn)確。

        3.一定要保證現(xiàn)配制現(xiàn)滅菌,未滅菌的配好培養(yǎng)基不能長時間放置,更不可隔夜。
        4.滅菌時要保證恒溫、恒壓,同時要保證有效的滅菌時間。

        5.滅菌過的培養(yǎng)基要冰箱保存,可保存一周,一般不超過 3 天。而且要遵循“先入先出”原則,先配制的要先使用。

        6.在使用時,要根據(jù)當(dāng)班次的使用量,用水浴鍋先將培養(yǎng)基溶化為液態(tài),然后及時調(diào)低水浴溫度(先化好的可從水浴取出,放在水浴鍋鍋蓋上)待用,千萬不可長時間使培養(yǎng)基處于高溫狀態(tài)。

        7.做產(chǎn)品微生物檢測時,傾倒培養(yǎng)基溫度在 45℃左右,不可過燙,避免將菌燙死;也不可過涼,化好的培養(yǎng)基又結(jié)塊凝固,不便于觀察結(jié)果。

        8.每瓶培養(yǎng)基均要做空白。

        9.盡量集中做樣,避免頻繁打開同一瓶培養(yǎng)基瓶塞,增大培養(yǎng)基的污染幾率,出現(xiàn)誤差結(jié)果。

        10.培養(yǎng)基剩余過少時,可先將其傾倒成空白用板。

         

         

        檢測環(huán)境的維持


        1、大環(huán)境(檢測室)
        (1)檢測時,窗戶和空調(diào)要關(guān)閉,或用酒精對房間進(jìn)行噴霧消毒,避免房間內(nèi)空氣流通影響超凈臺內(nèi)部環(huán)境(最 好在有通排風(fēng)系統(tǒng)的恒溫恒濕無菌間進(jìn)行操作)。

        (2)如果在原來的原料微生物檢測室進(jìn)行檢測,要定期開啟紫外燈,對房間進(jìn)行殺菌。

        2、小環(huán)境(超凈工作臺)
        1.定期清潔初效過濾器,要及時更換。

        2.檢測前,將超凈臺內(nèi)部進(jìn)行清潔,用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒,并提前半小時將超凈臺紫外燈打開,對超凈臺內(nèi)部環(huán)境進(jìn)行殺菌。

        3.關(guān)紫外燈,開風(fēng)機(jī),調(diào)整合適進(jìn)風(fēng)量,風(fēng)量不可過低。

        4.每次檢測后,要對超凈臺內(nèi)部進(jìn)行清理、清潔,并用 75%酒精進(jìn)行擦拭消毒。

        5.紫外燈根據(jù)其使用壽命要及時更換。

        6.檢測同時,要做上相應(yīng)菌落檢測的環(huán)境空白。

        7.檢測區(qū)域的選擇:
        a、一般在距離超凈臺外沿的 1/3-2/3 區(qū)域進(jìn)行無菌操作;
        b、要在酒精燈火焰的外焰保護(hù)區(qū)域進(jìn)行操作。

         

         

        工器具的潔凈度

         

        1.玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌。

        2.檢測用剪刀、勺子等物品要做到檢測專用,不可與其它操作器具混用,使用時,先用75%酒精消毒,再采用灼燒方式進(jìn)行滅菌。

        3.接種針(環(huán))采用灼燒方式進(jìn)行滅菌,但要注意檢測時要先將接種針(環(huán))進(jìn)行冷卻。

         


        樣品的采集及檢測

         

        1、保證采樣器具的無菌性
        (1)玻璃器皿:采用干熱滅菌方式進(jìn)行滅菌,保證恒溫、時間足夠(但不可時間過長,容易導(dǎo)致玻璃器皿易裂紋而報廢)。

        (2)取樣筐:使用前要用75%酒精進(jìn)行噴灑消毒。

        (3)取樣勺:要保證其清潔消毒,清潔后用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒。

        (4)取樣袋:可先用酒精進(jìn)行擦拭消毒,再在超凈臺用紫外燈照射消毒,(包裝車間要在傳遞窗用紫外燈照射消毒)。

        (5)電子稱表面用 75%酒精消毒。


        2、人員操作
        (1)保證手部的清洗、消毒:取樣前及檢測前都要先洗手再消毒。
        (2)取樣要具有代表性(隨機(jī)樣、目的樣、綜合樣)且要標(biāo)示清楚。
        (3)取樣完畢,不可在車間逗留,要及時將樣品放入超凈臺,對其外表面進(jìn)行紫外燈照射消毒。
        (4)在要求的檢測區(qū)域進(jìn)行操作。
        (5)檢測前,要用 75%酒精棉球?qū)悠反诓窟M(jìn)行擦拭消毒,再開口。
        (6)往鹽水瓶加樣品時,要注意勺子或袋子盡量不接觸瓶口。
        (7)樣品計(jì)量要準(zhǔn)確,稀釋倍數(shù)也要準(zhǔn)確(1mL 吸管不允許將管口敲掉),進(jìn)行 100 倍稀釋時,1mL 吸管要伸入鹽水中,不可以將樣品從管壁流下去,同時要避免將管底部捅破。
        (8)鹽水溫度以 40℃左右為宜,不能過熱,會將部分微生物燙死;也不能溫度太低,不能將樣品溶解完全。
        (9)進(jìn)行稀釋時,要搖勻,保證溶液的均一性。
        (10)傾倒平皿時,要注意培養(yǎng)基瓶口不要接觸到平皿;傾倒的培養(yǎng)基要適量,不可以太少,在培養(yǎng)過程中易干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右為宜。
        (11)做大腸菌群樣時,要提前將乳糖膽鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)管按需要量備好,放入超凈臺對外表面進(jìn)行紫外線滅菌。
        (12)接二步時,要注意先將接種針(環(huán))進(jìn)行冷卻,避免出現(xiàn)接不上菌落的情況,導(dǎo)致無法判斷、確認(rèn)。
        (13)檢測完畢,及時放入相應(yīng)培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),并清理清潔超凈臺。

         


        微生物的培養(yǎng)


        1.在培養(yǎng)過程中,要隨時監(jiān)控培養(yǎng)箱溫度,保證其在適宜的溫度進(jìn)行培養(yǎng)。
        2.要按照《微生物檢驗(yàn)規(guī)范》要求及時觀察結(jié)果,出現(xiàn)異常,要及時分析原因進(jìn)行反饋。

         

         

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